分装 Master Mix、酶、抗体这类昂贵试剂时,多道移液器在最后阶段"吸进空气",几乎是每个实验室都遇到过的场景。液面还剩薄薄一层,某根枪头却突然吸空了——体积不对、排液错误,这一排实验只能重来。问题通常不在移液器,而在储液槽本身:传统 V 形底储液槽的液体在液面降低后会分离、汇聚成团,枪头扎进的是液团之间的空隙。那些"够不到"的液体,连同枪头里的残留,统称为死体积。INTEGRA 的 Clear Advantage 储液槽用 SureFlo 防封闭矩阵从原理上解决了这个问题,本文拆解它的工作机制,并给出实测数据。
用 8 通道或 12 通道移液器往 96 孔板分装反应体系时,枪头从储液槽中逐次吸取试剂,槽内液面不断下降。当液面接近槽底,情况开始变得不可控:
传统储液槽的底部通常设计成 V 形,目的是让液体沿斜面滑向槽底,尽可能被吸尽。但随着液面越来越低,液体不再是一整片,而是受表面张力支配,分离成若干个独立的液团,各自"抱"在 V 形底的不同位置。多道移液器的枪头以固定间距排列,当枪头落点恰好落在液团之间的空隙时,吸入的就是空气。
枪头吸入空气的后果是连锁的:该通道实际吸入的液体体积与设定值不符,排液时还夹带气泡;整排枪头需要卸下重新润洗和预润湿;槽底剩余液体无法再被可靠吸取,只能连同枪头内壁的残留一起被处理掉。在严谨的实验流程里,储液槽中的剩余液体和枪头中的残留液体都应计入死体积——它们都是"花了钱却用不上的试剂"。
对 Master Mix、限制性内切酶、抗体这类按微升计价、按批次采购的试剂,死体积不是账面上的几十微升,而是每批次分装都要损失一部分成本。分装体积越小、液面压得越低,损失占比越高。
既然 V 形底已经在把液体往槽底汇聚,为什么还是吸不干净?关键在液体本身的物理性质——表面张力。
V 形斜面确实能让大部分液体流到槽底,但当液量很少时,液体与槽壁的接触面积相对增大,表面张力开始占主导。液体倾向于收缩成表面积最小的形态,也就是一个个"液团"。多个液团在 V 形底部同时存在、互不相连,中间留下空隙;液面越低,液体越分散,空隙越多。
另一个容易被低估的问题是枪头"封底"。枪头贴着槽底吸液时,一旦枪头口附近被液团包围,液体在表面张力作用下会沿枪头外壁爬升、包住枪口,造成局部封闭——吸液变慢、吸入量不足,甚至混入空气。这也是 SureFlo "防封闭"这一设计名称的由来。
传统 V 形底不是设计错了,而是只解决了"液体往哪流"的问题,没有解决"液体如何附着"的问题。
INTEGRA Clear Advantage 储液槽的思路,是在 V 形底之外另起一条技术路线:不追求"尽量汇聚",而是让液体在槽底均匀铺开、保持连续,并允许枪头贴底吸液而不发生封闭。这个目标由两个设计共同实现:
微小通道阵列(SureFlo 防封闭阵列)。储液槽底部布有一系列微小通道。液体通过这些通道顺畅、均匀地流过整个槽底,而不是被分隔在局部。枪头贴底吸液时,残留液体仍保持在通道与槽底之间流动,枪头不会因为"扎进液团"或"封住底部"而吸入空气。
特殊配方亲水表面处理。槽底经过特殊配方的亲水处理,降低了液体与槽底的接触角。液体更倾向于铺展成连续的薄膜,而不是收缩成孤立的液团——从源头上消除了"分离汇聚"这一步。亲水表面还让最后一层液膜保持在枪头可以到达的位置。
两个设计配合的效果是:液面可以一路吸到接近槽底,枪头贴底时吸到的始终是液体;槽内剩余液体被压缩到很小的量。这就是 SureFlo 储液槽死体积低于传统储液槽的原理基础。

▲ 图 2 传统 V 形底(左)液滴分离汇聚、枪头吸入空气;SureFlo 储液槽(右)液体均匀铺展、枪头贴底吸液
在分隔式型号上,这个原理进一步放大。25 ml 分隔式储液槽由 5 ml 和 10 ml 两个隔室并排组成,小体积试剂用小隔室分装,液面不必摊在宽槽里,死体积占比更低;两个隔室共用标准 25 ml 可重复使用的坚固底座,只需更换插槽。
原理讲得通,还得看数据。INTEGRA 技术说明公开了一组实测死体积数据,测试使用发泡封闭缓冲液——起泡性高、表面张力低,对储液槽而言是条件较严苛的液体,更能反映极限情况。表中的死体积为多道移液器吸至无法继续可靠吸取时,槽内剩余液体与枪头残留之和。
▲ 表 1 发泡封闭缓冲液条件下的死体积实测(来源:INTEGRA 技术说明)
| 储液槽 | 初始体积 | 死体积(均值±SD) | 占起始体积 |
|---|---|---|---|
| PS 10 ml 标准 | 3,600 μl | 51 ±10 μl | 1.4% |
| PS 25 ml 标准 | 9,000 μl | 80 ±12 μl | 0.9% |
| PP 25 ml 标准 | 9,000 μl | 65 ±10 μl | 0.7% |
| PS 100 ml 标准 | 36,000 μl | 120 ±14 μl | 0.3% |
| 分隔式 PS 5 ml 侧 | 1,800 μl | 9 ±2 μl | 0.5% |
| 分隔式 PP 5 ml 侧 | 1,800 μl | 10 ±4 μl | 0.6% |
| 分隔式 PS 10 ml 侧 | 3,600 μl | 27 ±5 μl | 0.8% |
| 分隔式 PP 10 ml 侧 | 3,600 μl | 30 ±10 μl | 0.8% |
把两端的数字放在一起:3,600 μl 初始体积下,传统 PS 10 ml 储液槽的死体积是 51 μl,SureFlo 分隔式储液槽 10 ml 隔室是 27 μl;更小的 5 ml 隔室(初始 1,800 μl)只有 9 μl,约占起始体积 0.5%。从 51 μl 到 9 μl,一次小体积分装的死体积大约被压缩到原来的六分之一。

▲ 图 3 同量级储液槽死体积实测对比:传统型号 51–120 μl,SureFlo 分隔式 9–27 μl(发泡封闭缓冲液)
几点值得注意:
▲ 表 2 SureFlo 储液槽与传统 V 形底储液槽的技术对比
| 对比维度 | 传统 V 形底储液槽 | SureFlo 储液槽 |
|---|---|---|
| 底部结构 | 光滑 V 形斜面 | 微小通道阵列 + 亲水表面处理 |
| 液面降低后的液体行为 | 分离、汇聚成多个液团 | 均匀铺展成连续薄膜 |
| 枪头贴底吸液 | 可能吸入空气或发生封闭 | 持续吸到液体,不封闭 |
| 典型死体积(10 ml 量级) | 51 μl(PS 10 ml 标准) | 27 μl(分隔式 10 ml 侧) |
| 小体积分装(5 ml 量级) | — | 9 μl(分隔式 5 ml 侧) |
| 对昂贵试剂的意义 | 残余试剂难以回收 | 残余液体基本可吸尽 |
需要说明的是,传统 V 形底并非一无是处:结构简单、成本有优势,对廉价缓冲液、大体积分装场景足够应付。SureFlo 的价值集中在试剂单价高、分装体积小、液面必须尽量用尽的场景——这正是分子生物学与自动化平台上的常态。
Clear Advantage 系列完整覆盖这些场景:多通道型(10/25/100 ml)、分隔式(25 ml)、12 孔型(3 ml/孔,9 mm 孔间距与 96 孔板一致)、自动化支持型(150/300 ml,带垫圈自密封盖与平底亲水处理;8 行型每行 32 ml、12 列型每列 21 ml)。材质上 PS 提供透明观察面,PP 提供化学兼容性。
死体积的组成不只是槽底剩余,枪头内壁挂液同样占一份。INTEGRA 技术说明给出的建议是预润湿枪头 3 次:吸液-排液循环 3 次后,枪头内壁形成饱和液膜,后续正式移液的挂壁残留显著减少,液体排出更干净。这也是移液行业普遍认可的操作做法。
配套设备能进一步减少死体积带来的损失:
SureFlo 防封闭矩阵解决的是"液体在槽底的行为"问题,它把死体积从几十微升量级压缩到个位数微升,但使用中仍有几点边界需要明确:
小结一句话:传统 V 形底解决"液体往哪流",SureFlo 解决"液体怎么附着、枪头怎么吸"——前者是几何设计,后者是界面工程。正是这两者的组合,把死体积从实验室的隐性成本变成了可以忽略的个位数微升。
茂默科学致力于为科研与检测实验室提供精准、高效的液体处理解决方案。如需了解 INTEGRA Clear Advantage 储液槽系列与 SureFlo 防封闭矩阵的选型与配套方案,欢迎咨询茂默科学技术团队。
免责声明:本文基于 INTEGRA 技术说明与公开产品信息撰写,供技术参考。死体积数据来自厂商技术说明实测,具体性能以制造商技术文件为准;不同液体与操作条件下的实际表现可能存在差异。
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