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厌氧培养箱的应用案列

更新时间:2020-06-09      点击次数:974

  茂默科学以客户为本、合作共赢的理念,致力于帮忙客户提供整体实验方案。力求解决行业内客户对科学仪器选型难、维护难的处境。通过不断优化公司运作和提升服务质量,目前已赢得业内人士和广大客户广泛认可,拥有广泛而稳固的合作伙伴和客户群体。茂默科学在此介绍厌氧培养箱的应用案例~欢迎咨询~

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。
  1.厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。

  2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有**化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。

  3.厌氧手套箱(Anaerobie glove box)即厌氧培养箱,是迄今为止上*的培养厌氧菌佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。

  4.厌氧盒:原理同厌氧袋,有成品销售。

  5.生物耗氧法:在一密闭的容器内放以生物(多是植物),消耗氧气,同时产生二氧化碳,供细菌生长用。我没见过。

  6.焦性末食子酸法:在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的白蜡封边,造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养,简单。如有梭状芽孢杆菌。

  7.疱肉培养基:本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管,液面封凡士林,造成无氧环境。

  操作室厌氧环境形成:按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋。通电源开照明灯,开控温仪,调节所需温度及安全温度。操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示剂(封闭)。关紧取样室内外门,并抽真空校验。操作室内di一次置换(氮气置换):先用橡皮管插入操作室内进气口,另一头插入塑料袋。接通氮气进气路,打开氮气控制阀,使二只塑料袋充足氮气,然后扎紧袋口。把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内,至全部放出。操作室第二次置换(氮气置换)重复一 次充氮过程,并注意随时用脚踏开关开闭排气。操作室第三次置换(混合气体置换):(混合气体配比为:N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%)调换气路打开混合气道通阀门进气,充气时要随时脚踏开关开闭排气。混合气充满塑料袋后,关掉混合气直通阀(三通阀),使混合气经过流量计输入操作并调整流量计,流量为每分钟10毫升左右。把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。通过三次换气后,操作室内气体含氧量已处于极微量状态。操作室内打开钯粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,一 小时后打开美兰指示剂(美兰安瓶)观察其变色的情况,不变色为操作室内达到厌氧环境。开紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理。灭菌时间自定。

  厌氧培养箱注意事项:尽可能地安装于空气清静,温度变化较小的地方。开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的说明书、掌握正确的使用方法。培养物放入必须是在操作室内达到jue对厌氧环境后放入。如发生故障(停气等原因)操作室内仍可保持12小时厌氧状态。(超过12小时则根据需要把培养物取出另作处理)。经常注意气路有无漏气现象。调换气瓶时,注意要扎紧气管,避免流入含氧气体。真空泵按要求使用,定期检查加油。停止使用,关闭总电源键,及设备后部的电源开关。

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